一、CO₂摇床标准操作规程
设备准备：检查CO₂摇床电源、气源（CO₂钢瓶）连接是否正常，确保CO₂减压阀压力稳定（通常0.1~0.2MPa）。打开设备电源，预热至设定温度（如37℃），并预热培养箱内水盘以维持湿度。
参数设置：根据细胞需求设定CO₂浓度（通常5%），通过红外或热导传感器校准；设定温度范围一般为室温至50℃，需提前预热避免温度波动；根据培养容器调整转速（50~300rpm）和振幅（通常5~50mm），避免液体溅出；水盘加入无菌蒸馏水，维持≥95%湿度。
样品放置：容器需密封（如使用透气盖膜或拧紧瓶盖），防止CO₂逸出和污染；平衡摆放样品，避免重心偏移影响摇床运行。
运行监控：定期检查CO₂浓度、温度是否稳定，记录运行参数；使用透气盖培养瓶或密封瓶时，需平衡CO₂渗透率。
结束操作：关闭CO₂气源，待浓度降至0%后再关机，避免传感器损坏；清洁水盘和腔体，防止微生物滋生。
二、细胞培养最佳实践指南
细胞类型与培养基选择：根据细胞类型选择合适的培养基，如DMEM适合快速增殖的细胞系，MEM适用于多种细胞类型；原代细胞需添加特殊生长因子。
细胞复苏与冻存：复苏时快速解冻细胞，减少冰晶损伤；冻存时添加冷冻保护剂（如10%DMSO），缓慢冷却至-80℃后转移至液氮。
无菌操作：所有操作在超净工作台内进行，穿戴实验服、手套、口罩和帽子；避免在操作区域说话和咳嗽，减少微生物通过空气传播的风险。
定期观察与记录：定期在显微镜下观察细胞生长情况，包括细胞形态、生长密度和有无污染等；记录相关数据，以便及时发现并处理异常情况。
设备维护与校准：定期校准CO₂传感器（每6个月一次），更换滤膜（如有）；清洁时断电，避免液体进入电路系统。
更新时间：2025-12-24
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